手机版必发88

基于定性PCR法的转基因食品分析

图1 基于定性PCR法的转基因食品分析步骤实例

基于定性PCR法的转基因食品分析步骤实例如图1所示。粉碎样品后,使用提取套件等提取DNA。使用生命科学紫外可见分光光度计BioSpec-nano测出提取DNA的DNA浓度,将所定量的提取DNA作为模板进行PCR。
使用微芯片电泳装置MCE-202“MultiNA”进行PCR产物的电泳分析,确认有无对应目标基因序列的PCR产物。

定性PCR法的分析灵敏度非常高,因此,可以检测到提取DNA中含有的微量转基因。分别生产流通管理中对于非转基因体的转基因体混入率的容许值为5%,但即使混入率在5%以下也常常使用定性PCR法检测转基因。以定性PCR进行转基因检测时,进一步使用定量PCR法求出混入率。定量PCR法将从样品提取的DNA作为模板,使用用于检测转基因以及内在性基因的引物实施PCR。

基于定量PCR扩增曲线的解析,求出提取DNA所含转基因以及内在性基因的数目(复制数)。式1、式2分别定义混入率(%)、内标比。表示其实施了分别生产流通管理的「分离非转基因的」或「非转基因」的食品,但其转基因体混入率超过5%时,需要审查分别生产流通管理的内容。并且,加工食品中,转基因与内在性基因的分解率不一定一致,因此不能准确求出混入率。

 

混入率(%)={(转基因的复制数) / (内在性基因的复制数)}×(1 / 内标比)×100   (式1)
内标比 =(纯粹的转基因农作物中的转基因数) / (纯粹的转基因农作物中的内在性基因数)   (式2)

[参考资料]
农林水产消费安全技术中心,JAS分析试验手册「转基因食品检查·分析手册」,
http://www.famic.go.jp/technical_information/jashandbook/index.html

Top of This Page